• 將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，待其*回升至室溫后方可使用，根據(jù)體積大小不同取出回溫的時間從1小時~2小時。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
•  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
•  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µL 到對應(yīng)的微孔中，加入氟苯尼考抗體50µL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20min。
•  洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，加入洗滌工作液300 µL/孔，每次靜置20s，甩去孔內(nèi)液體，重復(fù)洗滌3次，后一次用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
• 加酶標(biāo)物：加入氟苯尼考酶標(biāo)物100 µL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光孵育20 min。
• 甩干孔內(nèi)液體，重復(fù)洗板3次，后一次用吸水紙拍干。
• 顯色：加入底物液A液50 µL/孔，再加底物液B液50 µL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。
• 測定：加入終止液50µL/孔，用酶標(biāo)儀立即  測定450/630nm處的吸光度值。
  

  注意事項
  ① 根據(jù)體積大小不同取出回溫的時間從1小時~3小時，體積15毫升以上的優(yōu)先從冷藏環(huán)境取出 回溫。
  ②  洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
  ③ 反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
  ④不使用過了有效期的試劑盒，不交換使用不同批號的試劑。
  ⑤ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。
  ⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色    時間為10min即可。若顏色較淺，可延長反應(yīng)時間到15-20min，反之則減短反應(yīng)時間。
  ⑦ 底物液B液長期使用變?yōu)闇\藍色時，請放心使用，不影響檢測結(jié)果。