血液RNA核酸免提取試劑盒

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用特殊裂解液B從新鮮全血、抗凝血、血凝塊中提取并純化RNA。整個(gè)過(guò)程僅需要10分鐘。采用硅基材質(zhì)吸附柱，高效專一吸附RNA，保證提取高純度、高產(chǎn)量RNA。該裂解液配方中含有RNA保護(hù)劑，能夠抑制RNA降解、保護(hù)RNA完整，從而提高RNA產(chǎn)量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文庫(kù)構(gòu)建等。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

備注：1、第一次使用前，在洗滌液BW2中加入48mL無(wú)水乙醇，并標(biāo)記“√"和時(shí)間，避免重復(fù)加入。

保存條件

室溫保存一年。

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無(wú)水乙醇、1.5mL無(wú)RNase離心管、蛋白酶K（20mg/mL，或貨號(hào)QR0301）、DNase I（2U/μL，或貨號(hào)QR0102）

使用方法

1. 300μL血液（不足300μL，無(wú)菌PBS補(bǔ)齊）中加入500μL裂解液B和10μL蛋白酶K，顛倒混勻。

2. 55℃孵育2分鐘。

備注：如果RNA提取量比較低，可延長(zhǎng)孵育時(shí)間到10分鐘。

3. 12,000rpm離心30秒。取750μL上清。

4. 加入0.5倍體積無(wú)水乙醇，上下顛倒混勻，

5. 全部加入RNA吸附柱中，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

6. 向RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW1，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

7. 向RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW2，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

8. 重復(fù)步驟7一次。

9. 12,000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中廢液。

10. 將RNA吸附柱放入新1.5mL無(wú)RNase離心管中，加入30-50μL洗脫液B，室溫放置1分鐘。

11. 12,000rpm離心2分鐘，得到RNA溶液，-80℃保存。

注意事項(xiàng)

1. 務(wù)必在超凈臺(tái)中進(jìn)行操作，常換手套，防止RNA降解。

2. 盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取。

3. 使用無(wú)DNase無(wú)RNase的吸頭和離心管，防止RNA降解，常更換吸頭，防止交叉污染。

4. 為了提高洗脫效率，可提前將洗脫液B置于65℃水浴后再使用。

5. 根據(jù)后續(xù)試驗(yàn)需求，請(qǐng)使用DNase I（貨號(hào)QR0102）進(jìn)行基因組清除。

常見(jiàn)問(wèn)題解析